产品货号:
GL2816
中文名称:
大肠杆菌基因组DNA提取试剂盒(CTAB沉淀法)
英文名称:
Escherichia coli genomic DNA extraction kit
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品是简便的利用CTAB提取大肠杆菌基因组DNA的试剂盒,其提取原理是利用蛋白酶K消化蛋白,CTAB沉淀多糖,再经加热使蛋白变性与DNA分离,乙醇沉淀核酸获得基因组DNA,可进行酶切、PCR等下游实验。
大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)属于革兰氏阴性短杆菌,周生鞭毛,能运动,无芽孢,能发酵多种糖类产酸、产气,是人和动物肠道中的正常栖居菌,婴儿出生后即随哺乳进入肠道,与人终身相伴,几乎占粪便干重的1/3,获得DNA的量很高,纯度一般但足够用于大多数分子生物学实验,CTAB是一种阳离子去污剂,在高离子强度的溶液里CTAB与蛋白质和大多数酸性多聚糖以外的多聚糖形成复合物,只是不能沉淀核酸,因此CTAB可从产生粘多糖的有机体如植物及某些革兰氏阴性菌中制备纯化DNA。
组分 | 规格 | 保存 | |
蛋白酶K溶液 | 0.5mL | 0.5mL | -20℃ |
Ecoil裂解液 | 1.5mL | 2×1.5mL | RT |
CTAB沉淀液 | 10mL | 20mL | RT |
蛋白清除液 | 50mL | 100mL | 4℃避光 |
Ecoil漂洗液 | 100mL | 200mL | RT |
TE Buffer | 50mL | 100mL | RT |
保存:-20℃,避光,有效期6个月。
离心管、离心机、摇床、恒温箱或水浴锅、70%乙醇
- 用于裂解的噬菌体、宿主菌越新鲜,裂解越好、收获量越大。
- Ecoil裂解液在低温条件下会凝固,可用40~50℃温水助溶。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 取1.5mL菌液置于EP管,10000rpm离心2min,弃上清液,再次加入1.5mL菌液,重复该步骤1次。
- 加入30μL Ecoil裂解液和3μL蛋白酶K溶液,充分混匀,37℃孵育1h。
- 加入180μL CTAB沉淀液,充分混匀,65℃孵育10min。
- 加入780μL蛋白清除液,充分混匀,12000rpm离心5~10min。
- 转移上清至新EP管,加入2倍体积的Ecoil漂洗液,混匀,-20℃放置30min或过夜。
- 13000rpm离心10min,弃上清液,加入70%乙醇洗涤沉淀。
- 13000rpm离心10min,弃上清液,室温干燥DNA沉淀。
- 向沉淀中加入100μL或适量TE Buffer溶解沉淀,-20℃保存;TE Buffer体积越大,DNA浓度越低。
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